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牛血清在培養(yǎng)的過程中出現(xiàn)“小黑點”的現(xiàn)象該怎么防止呢?

更新時間:2020-10-12   點擊次數(shù):1210次
   牛血清是細胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,具有極為重要的功能。牛血清在培養(yǎng)基中扮演著這么多的角色,那么它在培養(yǎng)的過程中也會出現(xiàn)一些的問題,比如說:在培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)一個個“小黑點”的現(xiàn)象,這是怎么一回事呢?
  我們一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中有黑點,我們先不要著急,也不要驚慌,要搞清楚這個黑點是什么?什么形成的?
  首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動等。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
  首先可能是細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;再有可能就是血清質(zhì)量不好,反復凍融的結(jié)果;然后可能是配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;其次可能是亦有可能是配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格(可應用離心、過濾的方法去除這些黑點);后可能是培養(yǎng)的原代細胞中出現(xiàn)小黑點(可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除)。
  那么我們?nèi)绾畏乐购邳c生成呢?通過我們多年的從業(yè)經(jīng)驗,凱學生物科技認為至少要做到以下幾點:
  (1)盡可能地減少血清凍融次數(shù);
  (2)培養(yǎng)基無需37℃水浴;
  (3)培養(yǎng)基保持*PH值7.0- 7.2;
  (4)嚴格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗;
  (5)掌握細胞傳代的zui時機,細胞切勿生長過老。
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